Skip to content

waryńskiego 6 gastroskopia

2 miesiące ago

568 words

Mutacje w myocilinie (MYOC) są ważną przyczyną POAG. Poczyniono znaczne postępy w zrozumieniu roli zmutowanego MYOC w jaskrze przy użyciu kultury komórkowej. Jednak mechanizmy in vivo prowadzące do jaskry związanej z MYOC nie są dobrze poznane z powodu braku wiernego modelu zwierzęcego. My i inni wcześniej próbowaliśmy wygenerować mysi model jaskry przez nokaut mysiego genu Myoc (8), jak również przez knockin specyficznych ludzkich mutacji (21). Strategie te prowadziły do myszy, które nie miały ani fenotypu, ani fenotypu o minimalnej jaskrze. Tutaj przedstawiamy rozwój modelu mysiego, który ściśle replikuje fenotyp POAG obserwowany u pacjentów z jaskrą. W obecnej pracy wykorzystaliśmy promotor CMV do kierowania ekspresją ludzkiego genu MYOC zawierającego mutację Y437H. Stwierdziliśmy, że promotor CMV ma potencjał do względnie wysokiej ekspresji MYOC w odpowiednich tkankach. Mutację Y437H wybrano, ponieważ pacjenci z tą mutacją mają wczesne (młodzieńcze) wystąpienie POAG z podwyższonymi IOP (4). Ludzki transgen zamiast mysiego został wstawiony ze względu na potencjalne istotne różnice między mykalnym i ludzkim MYOC. Okazało się, że zmutowany ludzki transgen ulega ekspresji w tkankach istotnych dla rozwoju jaskry, w szczególności kąta tęczówkowo-rogówkowego, w tym TM i twardówki. Transgen nie ulega ekspresji w siatkówce myszy Tg-MYOCY437H. Ten wzór jest podobny do ekspresji endogennego genu. Wiadomo, że promotor CMV niekoniecznie prowadzi do wszechobecnych transgenów. Metylacja DNA promotora CMV odgrywa ważną rolę w specyficznym tkankowo wyciszaniu transgenów (22). Zatem możliwe jest, że brak ekspresji transgenu w siatkówce wynika z metylacji promotora CMV. Badanie odpowiednich fenotypów u myszy Tg-MYOCY437H ujawnia rozwój fenotypów jaskry blisko naśladujących te obserwowane u ludzi. Warto zauważyć, że dorosłe transgeniczne myszy rozwijają podwyższone IOP w wieku około 3 miesięcy i podlegają progresywnej śmierci RGC i zwyrodnieniu nerwu wzrokowego. Zmutowane myszy nie wykazują innych fenotypów ocznych lub nieokreślonych. Uważamy, że mysz Tg-MYOCY437H jest pierwszym genetycznym modelem POAG związanego z MYOC, który wiernie odtwarza ludzkie zaburzenie. Uważamy, że bardzo intrygujące jest to, że śmierć komórek RGC nie jest liniowa, mimo że IOP jest ciągle podwyższone od 3 miesiąca życia. Jest możliwe, że początkowe podniesione uszkodzenie IOP powoduje śmierć komórki określonego typu RGC, które są najbardziej wrażliwe na uszkodzenia związane z ciśnieniem, podczas gdy pozostałe RGC są bardziej odporne na śmierć komórki przez podwyższony IOP. Należy jednak zauważyć, że PERG, który jest pomiarem funkcji RGC, dramatycznie maleje wraz z wiekiem (40% u 4-miesięcznych myszy Tg i 60% u 12-miesięcznych myszy Tg-MYOCY437H). Przyszłe badania będą miały na celu dalsze zrozumienie utraty RGC u myszy Tg. Rozwój myszy Tg-MYOCY437H był okazją do zbadania patofizjologii in vivo jaskry związanej z MYOC. Normalny MYOC jest wydzielany, chociaż istnieją sprzeczne doniesienia dotyczące wewnątrzkomórkowej lokalizacji MYOC (23. 25). Badania in vitro wykazały, że mutacje missense I477N i P370L w ludzkim MYOC prowadzą do akumulacji zmutowanego białka w ER (11, 13). Tutaj pokazujemy, że Y437H MYOC akumuluje się wewnątrzkomórkowo w ER pierwotnych komórek TM. Ponadto, miocylina gromadzi się również w ER tkanki TM in vivo, co wynika z kolokalizacji markera ER KDEL z myocyliną u myszy Tg-MYOCY437H. Zgodnie z brakiem wydzielania i akumulacji zmutowanego MYOC w ER, MYOC jest znacznie zmniejszony w cieczy wodnistej myszy Tg-MYOCY437H w porównaniu z kontrolnymi
[więcej w: hiperamonemia, zapalenie migdałków objawy, zapalenie nerwu twarzowego ]

0 thoughts on “waryńskiego 6 gastroskopia”