Skip to content

robert szymański warszawa

2 miesiące ago

650 words

Stosując test bezkomórkowy z unieruchomionym sRAGE (25), potwierdziliśmy, że FPS-ZM1 ma około 2-krotnie większą siłę hamowania hamowania wiązania Ap / RAGE niż FPS2 (Figura 2A). Ponadto, FPS-ZM1 hamowało wiązanie innych znanych ligandów RAGE z sRAGE, w tym białko B wiążące wapń S100 (S100B) i amfoterynę (grupa o wysokiej ruchliwości [HMGB1]) (Figura 2B). Jednak stałe hamujące dla tych ligandów były znacznie niższe niż dla A .. Co ważne, FPS-ZM1 wiąże się tylko z unieruchomionym sRAGE (dodatkowa Figura 3A) i nie wiąże się z unieruchomionym A. (Dodatkowa Figura 3B) lub inne badane ligandy RAGE (nie pokazano). Od S100B, HMGB1 i A. wiążą się z domeną V RAGE (25, 31), te wyniki wstępnie sugerowały, że FPS-ZM1 prawdopodobnie hamuje wiązanie ligandów z domeną V RAGE. Figura 2FPS-ZM1 i FPS2 hamują wiązanie A (3 / RAGE w testach bez komórek i w oparciu o komórki. (A) 125I-AS40 (5 nM) wiąże się z unieruchomionym ludzkim sRAGE w obecności FPS2 lub FPS-ZM1 (10-500 nM). (B) 125I-HMGB1 (5 nM) lub 125I-S100B (5 nM) wiąże się z sRAGE w obecności FPS-ZM1 (10. 1000 nM). W A i B Ki oznacza stałą hamującą. (C) 125I-Ap40 (5 nM) wiąże się z unieruchomioną ludzką rekombinowaną domeną RAGE V (Vd) lub domeną C1C2 (C1C2d) zi bez FPS-ZM1 (200 nM) i sRAGE zi bez domeny C1 swoistej dla RAGE przeciwciała (anty-C1d), domenę C2 (anty-C2d) lub domenę V (anty-Vd) (20 .g / ml), NI-IgG i FPS-ZM1 (100 nM). (D) A40 i A. 42 wiążą się z unieruchomionym ludzkim sLRP zi bez FPS-ZM1 (1. M) lub RAP (1. M). (E) indukowany przez 40 (1. M) TBARS w komórkach RAGE-CHO w obecności nośnika (zamknięty trójkąt) lub różne stężenia FPS2 (białe kółka) i FPS-ZM1 (czarne kółka). (F) Indukowana a40 (1. M) aktywacja NF-kB w komórkach RAGE-CHO zi bez FPS2 i FPS-ZM1. (G3I) mRNA BACE1 (G), białko BACE1 (H) i wydzielany sAPP. Poziomy (I) określone przez qRT-PCR, immunoblotting i odpowiednio ELISA, w hodowlach SH-SY5Y traktowanych nośnikiem lub Ap40 (1 (M) z lub bez FPS2 lub FPS-ZM1 (50 nM) po transdukcji z Ad . GFP lub zmutowana reklama. I. B-. (S32, 36A) i / lub transfekcję za pomocą kodowanego siRNA lub RAGE-siRNA. Wszystkie wartości są średnie. SEM. n = 3. 5 niezależnych eksperymentów. P-aktyna została użyta jako kontrola obciążenia w H. Aby określić, czy FPS-ZM1 rzeczywiście wiąże się z domeną V RAGE, przeanalizowaliśmy wiązanie 125I-A340 do rekombinowanej domeny V i domen C1. C2 w obecności i brak hamujących stężeń FPS-ZM1. Jak informowaliśmy, A. związany z domeną V, ale nie z domenami C1. C2 (31), a jego wiązanie z domeną V zostało zniesione przez FPS-ZM1 (Figura 2C). Zgodnie z tymi danymi, FPS-ZM1 zahamował wiązanie Ap40 z SRAGE w obecności domeny C1. i przeciwciała blokujące domenę C2, podczas gdy przeciwciało swoiste wobec domeny V blokowało A. wiązanie do sRAGE, jak podano (31), zapobiegając efektowi hamowania FPS-ZM1a (Figura 2C). Dane te pokazują, że FPS-ZM1 specyficznie blokuje A. powiązanie z domeną V RAGE. Przy użyciu czułego testu ELISA wykazaliśmy, że FPS-ZM1 nie hamuje wiązania Ap40 i Ap42 z innym ważnym A. receptora, tj. związanego z receptorem LDL białka-1 (LRP) (Figura 2D), który jest głównym receptorem dla receptora A. na BBB (9). Rysunek 2D pokazuje brak wpływu FPS-ZM1 na A. wiązanie z unieruchomionym rozpuszczalnym LRP (sLRP), w przeciwieństwie do prawie całkowitego hamowania wiązania Ap40 i Ap42 przez białko związane z receptorem (RAP), które blokuje wiązanie A (3. i inne ligandy LRP do LRP / sLRP (9). Swoistość wiązania FPS-ZM1 z RAGE została następnie potwierdzona in vivo (patrz poniżej). Testy oparte na komórkach z nowymi inhibitorami RAGE
[przypisy: zakrzepica leczenie, zespół aspergera test, zapalenie przyzębia ]

0 thoughts on “robert szymański warszawa”

  1. [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: kabiny prysznicowe z hydromasażem[…]