Skip to content

hospicjum domowe starogard gdański

2 miesiące ago

106 words

Wyniki te wskazują również, że fuzja CRT z E7 była wymagana do wzmocnienia aktywności komórek T CD8 +, ponieważ DNA CRT zmieszane z DNA E7 nie powodowało zwiększenia aktywności komórek T CD8 +. Nie zaobserwowaliśmy wzrostu liczby specyficznych dla E7 komórek wydzielających IFN-y lub komórek T CD4 + wydzielających IL-4. u myszy zaszczepionych DNA CRT / E7 w porównaniu z myszami szczepionymi plazmidem kontrolnym, E7, CRT lub DNA CRT + E7. (Ryc. 2, b i c). Jak pokazano na Fig. 2d, szczepienie DNA CRT / E7 generowało znacząco wyższe miana przeciwciał anty-E7 w surowicy myszy w porównaniu z innymi szczepionymi grupami (P <0,01). Figura 2Immunologiczny profil szczepionych myszy z zastosowaniem wewnątrzkomórkowego barwienia cytokinami i ELISA. Myszy immunizowano i splenocyty przygotowano jak opisano w Metodach. Liczba (a) prekursorów komórek T CD8 + wydzielających IFN - (b) komórek T CD4 + wydzielających IFN - y oraz (c) komórek T CD4 + wydzielających IL-4p w obecności (wypełnione kolumny) lub nieobecności ( otwarte kolumny) odpowiedniego peptydu E7 (aa 49-57 dla CD8, aa 30-67 dla CD4) analizowano za pomocą cytometrii przepływowej. Dane wyrażono jako średnią liczbę limfocytów T wydzielających IFN na splenocyty 3 × 105. SEM. (d) Test ELISA demonstruje specyficzne dla E7 Ab na myszach zaszczepionych różnymi szczepionkami DNA. Przedstawiono wyniki rozcieńczenia 1: 100, 1: 500 i 1: 1000, pokazujące średnią absorbancję (OD 450 nm). SEM. Dane zebrane ze wszystkich powyższych doświadczeń pochodzą z jednego reprezentatywnego doświadczenia dwóch wykonanych doświadczeń. Wzmocniona prezentacja E7 poprzez szlak MHC klasy I w komórkach transfekowanych DNA CRT / E7 oraz w komórkach dendrytycznych pulsowanych chimerycznym białkiem CRT / E7. Zbadaliśmy potencjalne wyjaśnienia obserwowanego wzrostu prekursorów komórek T CD8 + swoistych dla E7 u myszy zaszczepionych DNA CRT / E7. Jednym z możliwych wyjaśnień jest to, że nastąpiło bezpośrednie wzmocnienie prezentacji E7 MHC klasy I w komórkach eksprymujących CRT / E7. Przeprowadziliśmy zatem test CTL z użyciem komórek 293Db, Kb transfekowanych różnymi konstruktami DNA jako komórkami docelowymi i ograniczoną do D-2 Db specyficzną dla E7 linią komórek CD8 + T jako komórki efektorowe (21). Komórki 293Db, Kb zastosowano jako komórki docelowe, ponieważ wyrażają mysią cząsteczkę MHC klasy I H-2 Db (28) i mają stabilną wysoką wydajność transfekcji (do 80%). Jak pokazano na Figurze 3a, 293Db, komórki KB transfekowane DNA CRT / E7 generowały znacząco wyższy procent swoistej lizy w 9: (20,5%. 1,0% w porównaniu z 10,43%. 0,9%, P <0,001) i 27: (47,1%> 5,5% w porównaniu z 15,1%> 3,0%, P <0,001) stosunki E / T w porównaniu z myszami zaszczepionymi DNA E7 typu dzikiego. Nasze wyniki sugerują, że komórki transfekowane DNA CRT / E7 były zdolne do bezpośredniej prezentacji antygenu E7 przez szlak MHC klasy I do komórek T CD8 + skuteczniej niż komórki transfekowane DNA E7 typu dzikiego. Figury 3CTL mają na celu zademonstrowanie ulepszonej prezentacji E7 za pośrednictwem szlaku MHC klasy I w komórkach transfekowanych DNA CRT / E7 i w DC pochodzących z szpiku kostnego pulsowanych lizatami komórek zawierającymi chimeryczne białko CRT / E7. (a) Testy CTL o różnych stosunkach E / T (E / T = 1: 1, 3: 1, 9: 1, 27: 1) przeprowadzono w sposób opisany w Metodach. Komórki 293Db, Kb transfekowane różnymi konstruktami DNA zastosowano jako komórki docelowe, podczas gdy komórki T CD8 + z ograniczonym Db specyficzne względem E7 zastosowano jako komórki efektorowe. (b) Testy CTL przeprowadzono przy ustalonym stosunku E / T wynoszącym 9: przy użyciu DC pochodzących z szpiku kostnego pulsowanych lizatami komórek z 293Db, komórki KB transfekowane różnymi konstruktami DNA w różnych stężeniach jako komórki docelowe i E7 z ograniczeniem Db -swoiste komórki T CD8 + jako komórki efektorowe. Wyniki przedstawione na tej figurze pochodzą z jednego reprezentatywnego doświadczenia dwóch wykonanych. Innym potencjalnym mechanizmem obserwowanego wzmocnienia specyficznych względem E7 odpowiedzi immunologicznych komórek T CD8 + in vivo jest tak zwane. Primowanie krzyżowe. efekt (29), w którym białko CRT / E7 uwalniane z komórek może być wychwytywane i przetwarzane przez inne komórki prezentujące antygen (APC) za pośrednictwem ograniczonej drogi MHC klasy I. [patrz też: zatorowość płucna objawy, zapalenie przyzębia, zespół fallota ]

0 thoughts on “hospicjum domowe starogard gdański”